【摘 要】
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目的 转染pEGFP-N1-H2B1 质粒载体至小鼠血管内皮细胞(VEC),观察H2-Bl 基因对小鼠VEC 凋亡与增殖的影响,探讨借鉴母胎免疫耐受模型预防心脏移植术后免疫排斥反应的机制.方法
【机 构】
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山西医科大学第二医院心胸外科,山西医科大学第二医院血管外科
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目的 转染pEGFP-N1-H2B1 质粒载体至小鼠血管内皮细胞(VEC),观察H2-Bl 基因对小鼠VEC 凋亡与增殖的影响,探讨借鉴母胎免疫耐受模型预防心脏移植术后免疫排斥反应的机制.方法 0.5 μg/ml 空质粒、0.5 μg/ml H2-Bl 质粒、1.0 μg/ml H2-Bl 质粒转染小鼠VEC 后,采用实时荧光定量PCR、流式细胞仪、酶标仪检测不同时间质粒的转染效率、H2-Bl 基因mRNA 的相对表达量、转染VEC 的凋亡与增殖情况.结果 荧光定量PCR 结果显示,0.5 μg/ml、1.0 μg/ml H2-Bl 质粒组的H2-Bl 基因mRNA 表达量均高于对照组(P ＜0.05,P ＜0.001).H2-Bl 基因促进VEC 凋亡,转染48 h、72 h 后1.0 μg/ml H2-Bl 质粒组与空白对照、0.5 μg/ml 空质粒比较,差异有统计学意义(P ＜0.05).H2-Bl 基因抑制VEC 增殖,转染24 h、48 h、72 h 后0.5 μg/ml H2-Bl 质粒组、1.0 μg/ml H2-Bl质粒组分别与空白对照组、0.5 μg/ml 空质粒组比较, 差异均有统计学意义(P ＜ 0.01).结论 pEGFP-N1-H2B1质粒载体转染小鼠VEC 后,能够有效促进其凋亡,抑制其增殖,减弱小鼠VEC活性,诱导免疫耐受.
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