【摘 要】
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目的探讨CCK、Gastrin对胆管癌细胞凋亡的影响及其机理.方法以beauvericin为凋亡诱导剂,应用TUNEL荧光染色、流式细胞仪检测和反义bcl-2寡核苷酸技术初步探讨了CCK、Gastrin
【机 构】
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重庆第三军医大学附属西南医院全军肝胆外科研究所
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目的探讨CCK、Gastrin对胆管癌细胞凋亡的影响及其机理.方法以beauvericin为凋亡诱导剂,应用TUNEL荧光染色、流式细胞仪检测和反义bcl-2寡核苷酸技术初步探讨了CCK、Gastrin对胆管癌细胞凋亡阈值的影响,及用免疫组化、原位杂交、流式细胞术、RT-PCR等技术,研究了凋亡相关基因bcl-2和bax在其中的作用.结果发现beauvericin40μM、作用12h,QBC939胆管癌细胞的存活率降低35%～40%,80%左右的胆管癌细胞出现不同程度的凋亡;CCK、Gastrin对胆管癌细胞凋亡阈值有上调作用;CCK/Gastrin受体拈抗剂L60和L18及反义bcl-2寡核苷酸可抑制它们的作用.CCK、Gastrin在转录和翻译水平对bcl-2基因表达均有显著的促进作用,而对bax基因无明显影响;CCK-A受体或CCK-B/Gastrin受体拮抗剂则明显抑制Gastrin-17和CCK-8S对bcl-2基因的促表达作用.结论CCK和Gastrin通过对bcl-2基因表达的上调,抑制了胆管癌细胞的凋亡.本研究在理论上扩展了CCK/Gastrin对肿瘤生长调控的机理、丰富了消化道肿瘤凋亡调控的机制,也为胆管癌的辅助治疗提供了新的思路.
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