观察应激诱导磷酸化蛋白1(STIP1)通过调控分化抑制因子3(ID3)的表达在胃癌细胞上皮-间充质转化及侵袭迁移过程中的作用并探讨其机制。
方法Western blot和实时定量反转录聚合酶链反应(RT-qPCR)法检测胃癌细胞(BGC803)和正常胃黏膜细胞(GES-1)2株细胞中STIP1、ID3的mRNA及蛋白的表达。转染STIP1过表达载体和小干扰RNA(siRNA)感染序列至胃癌细胞，检测STIP1和ID3的表达。细胞计数试剂盒(CCK-8)法检测细胞增殖活力，Transwell检测细胞迁移及侵袭，Western blot检测上皮型钙黏蛋白(E-cadherin)、波形蛋白(Vimentin)的表达，并与阴性转染细胞比较。
结果STIP1 mRNA和蛋白在BGC803的相对表达量分别为1.851±0.058，2.033±0.107，明显高于GES-1中的1.000±0.034，1.000±0.031(t＝21.924，P＝0.000；t＝16.061，P＝0.004)。ID3 mRNA和蛋白在BGC803的相对表达量分别为1.629±0.063，2.374±0.096，明显高于GES-1中的1.000±0.025，1.000±0.029(t＝16.074，P＝0.004；t＝23.731，P＝0.002)。转染STIP1过表达载体后ID3 mRNA的相对表达量为2.018±0.124，较对照组1.331±0.036(t＝9.216，P＝0.012)明显升高；转染48 h和72 h后细胞增殖水平明显高于对照组(t＝10.594，P＝0.002；t＝8.269，P＝0.004)；侵袭细胞数、迁移细胞数较对照组明显增加(t＝5.669，P＝0.011；t＝5.265，P＝0.013)；Vimentin的表达明显升高(t＝7.410，P＝0.005)，E-cadherin明显降低(t＝－5.821，P＝0.010)。转染STIP1 siRNA感染序列后ID3 mRNA的相对表达量为0.732±0.037，较对照组的1.252±0.051明显降低(t＝－14.295，P＝0.001)；转染48 h、72 h后细胞增殖水平明显低于对照组(t＝－19.851，P＝0.000；t＝－19.222，P＝0.008)；侵袭细胞数、迁移细胞数较对照组明显减少(t＝－5.822，P＝0.010；t＝－4.859，P＝0.017)；Vimentin的表达明显降低(t＝－6.244，P＝0.008)，E-cadherin明显升高(t＝7.697，P＝0.005)。
结论STIP1调控ID3表达促进胃癌细胞增殖、侵袭、迁移和上皮-间充质转化。