【摘 要】
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目的:探讨益肾泄浊方含药血清对高糖环境下人肾小球内皮细胞的保护作用及其机制.方法:体外培养的人肾小球内皮细胞分为空白组、模型组、空白血清对照组、益肾泄浊方含药血清低剂量组、益肾泄浊方含药血清高剂量组,每组设置3个复孔.除空白组外,每组给予含30 mmol·L-1D-葡萄糖的ECM培养基培养2h后,给予相应药物进行干预,分别于干预24 h、48 h后,CCK-8法检测各组细胞的增殖情况;ELISA法检测细胞上清中肿瘤坏死因子-α(tumor necro-sis factor-α,TNF-α)、纤维蛋白原样蛋
【机 构】
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上海中医药大学附属岳阳中西医结合医院,上海200437
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目的:探讨益肾泄浊方含药血清对高糖环境下人肾小球内皮细胞的保护作用及其机制.方法:体外培养的人肾小球内皮细胞分为空白组、模型组、空白血清对照组、益肾泄浊方含药血清低剂量组、益肾泄浊方含药血清高剂量组,每组设置3个复孔.除空白组外,每组给予含30 mmol·L-1D-葡萄糖的ECM培养基培养2h后,给予相应药物进行干预,分别于干预24 h、48 h后,CCK-8法检测各组细胞的增殖情况;ELISA法检测细胞上清中肿瘤坏死因子-α(tumor necro-sis factor-α,TNF-α)、纤维蛋白原样蛋白2(fibrinogen-like protein2,fgl2)凝血酶原酶水平;RT-PCR法检测细胞中TNF-α mRNAfgl2凝血酶原酶mRNA的表达情况;分析细胞上清中TNF-仪与fgl2凝血酶原酶水平的相关性及细胞中TNF-α mRNA与fgl2凝血酶原酶mRNA表达的相关性.结果:与空白组比较,模型组肾小球内皮细胞的增殖率显著降低(P＜0.05),细胞上清中TNF-α、fgl2凝血酶原酶水平及细胞中TNF-αmRNA 、fgl2凝血酶原酶mRNA表达水平显著升高(P＜0.05);与模型组比较,益肾泄浊方能显著提高人肾小球内皮细胞增殖率(P＜0.05),显著降低细胞上清中TNF-α、fgl2凝血酶原酶水平及细胞中TNF-α mRNA、fgl2凝血酶原酶mRNA表达水平(P＜0.05),且细胞上清中TNF-α与fgl2凝血酶原酶水平及两者mRNA表达水平呈正相关关系.结论:益肾泄浊方含药血清能保护高糖环境下肾小球内皮细胞损伤,其可能的作用机制是通过纠正由炎症因子TNF-α介导的免疫凝血功能异常,缓解肾脏微循环障碍,保护肾脏功能.
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