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采用硫酸溶液烘箱恒温水解法,建立了适合含乳食品中动物水解蛋白L-羟脯氨酸的检测方法。结果表明：该方法简便快速、线性范围宽、检出限低、灵敏度高、重复性好适用于大批量样品的测定。方法加标回收率为92.4%-96.2%,变异系数CV为1.6%-2.5%。方法准确度、精密度都满足GB/T27404-2008实验室质量控制规范食品理化检测附录F检测方法确认的技术要求。可作为含乳食品中动物水解蛋白L-羟脯氨酸检测的首选方法。