论文部分内容阅读
目的：在大肠杆菌中表达Clusterin蛋白，并制备其兔抗Clusterin蛋白的多克隆抗体。方法：从MCF-7细胞提取mRNA，逆转录为eDNA，以此为模板PCR扩增Clusterin编码基因；将Clusterin编码区eDNA插入的pRSET-A原核表达载体，构建pRSET-A-elusterin；将重组质粒转化BL21（DE3）感受态细菌，以IPTG诱导6×His-C1usterin融合蛋白的表达，经亲和纯化柱与凝胶柱进行层析纯化。经SDS-PAGE和Western-blot鉴定后，将纯化