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从发病死亡的普氏野马无菌采集肝脏、脾脏、肠系膜淋巴结和肠道内容物，在实验室进行病原分离与鉴定，在采集病料中未分离到病毒；在肝、脾、肾和肠涂片上发现大量有荚膜的G^＋大杆菌，涂片放置数小时后可观察到芽胞。在鲜血琼脂上分离到一株G^＋大杆菌，菌落周围呈β溶血环。在厌氧肉肝汤中增菌培养，分离到兼性厌氧的G^＋杆菌，有荚膜，有芽胞。取肠内容物加生理盐水稀释，离心取上清液，滤过除菌后分成两份；一份加热（100℃ 15min），一份不加热，分别注射小鼠尾静脉，12h后不加热组小鼠死亡，证明有毒素存在。另将滤液分成5份