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摘 要：禽流感病毒作为一种人类致病性病毒，有着变异性强、传播速度快以及病死率高等特征，对于人民的健康生命安全也会造成严重的威胁。全球范围内进行禽流感疫病防控的原则在于早发现、早隔离、早诊断跟早控制，也就要求相关部门进行禽流感病毒检测模式的不断优化与完善，并需要从病原学跟血清学两方面入手，进行现有禽流感病毒检测方法的不断优化，本文主要就禽流感病毒检测方法进行了探究分析。
关键词：禽流感;病毒检测;方法
禽流感病毒属于正黏病毒科的一种，可以引起禽类呼吸系统到严重全身败血症等多种病症，并能够直接感染到人体。此外禽流感病毒有着非常强的变异性，若未在第一时间内得到有效的干预控制，还会造成非常严重经济损失跟社会损失。我国作为一个人口大国，高致病性的禽流感对于人民的健康安全跟国民经济均会造成非常大的威胁，也就需要加强对禽流感病毒检测方法的不断强化与完善，来获得良好的禽流感防控效果。
一、血清学检测
1.血凝实验跟血凝抑制实验
该试验方法作为WHO在全球范围内常用的一种禽流感检测方法，也是我国现阶段禽流感检测工作中的常见检测手段。在进行禽流感病毒的检测过程中，采用血凝实验方法具备有特异性高以及操作简便的应用优势，但是在检测过程中需要进行NDV等病毒的排除，对于病毒种类也无法进行直接的检测。这样就容易出现假阳性的检测结果，使得禽流感检测的准确性无法得到有效保障。
2.酶联免疫吸附试验
在禽流感病毒检测过程中采用酶联免疫吸附法，还有这面感性高的特征，对于抗原跟抗体均能够起到良好的检测效果，因此在大批血清样本的检测过程中也获得了广泛的应用。近年来我国的ELISA检测技术得到了迅速的发展，诊断时间以及诊断试剂也得到了一定程度的优化。相关研究人员采用昆虫杆状病毒表达系统所制定的禽流感病毒HA蛋白，能够对该类型的禽流感病毒起到良好的检测效果，还具有非常高的重复性跟稳定性。
3.电化学发光免疫法
元文宝等研究人员选用了钌联吡啶对H9亚型AIV的单克隆抗体进行标记，并对生物素化多抗的最佳工作浓度进行了优化，进行了临界点跟反应谱的确定，对构建完成的方向进行了试验，结果表明采用电化学发光免疫法能够对临床上的禽流感病毒起到良好的检测效果，对于H9亚型禽流感病毒的监测以及防控工作也有着非常积极的意义。所有相关研究人员还需要加强对该方面的重视力度，为我国的禽流感病毒检测工作提供一定的帮助。
4.纳米荧光检测方法
为了实现对禽流感病毒的有效检测，相关研究人员还采用纳米荧光方法进行了H9亚型AIV的检测体系，结果表明该类型的禽流感病毒在纳米荧光检测模式中能够获得良好的检测效果。此外构建完成的H9亚型纳米荧光检测具备有良好的检测特异性，跟其他的亚型AIV病毒也无交叉性，检测结果准确，可以在H9亚型禽流感病毒的检测工作中得到有效应用。
二、分子生物学诊断方法
1.多重PCR检测法
在结合GenBank上已经登录的AIV的M基因以及NDV的F基因所合成的2对引物，能够采用优化反應条件的模式，来对这几种禽流感病毒进行PCR检测，并且就该检测方法的敏感性、重复性以及特异性进行了检验。结果表明通过多重PCR检测法的应用，能够对这两种病毒起到迅速准确的鉴别效果，并能够在临床上完成这两种病原的鉴别诊断工作，因此值得在临床诊断上进行应用跟推广。
2.实时荧光定量PCR
该检测方法是在DNA扩增反应中，采用荧光物质对每次的PCR循环产物量进行测定，在此基础上进行禽流感病毒的检测工作。通过对NCBL数据库中的亚型AIV的HA基因序列进行分析，在此基础上进行特异性引物的针对性设定，随后构建针对该禽流感病毒的荧光定量PCR检测方法，能够对该禽流感病毒起到良好的诊断效果。相关研究表明采用实时荧光定量PCR检测法，还具备有非常高的检测敏感度，对于各种AIV病毒的检测也能够提供良好的技术支持，还可以实现对外来AIV的有效监测，避免禽流感病毒所造成的各种影响。
3.环介导等温扩增技术
该技术在测定过程中不需要采用大型的仪器设备，并且具备有操作简单、成本低廉以及检测速度快的应用优势。跟常规分子生物学方法进行对比，该办法具备有更高的灵敏性以及特异性，适合在基层的兽医实验室以及养殖场内进行应用跟推广。此外在该反应体系中，还能够采用优选的冻干保护剂来进行冷冻干燥处理，并且可以直接进行试剂盒的制作，对后续的检验工作提供良好的帮助。
三、结语
近年来我国的禽流感病毒检测技术得到了迅速的发展，禽流感检测手段也变得越来越多。但是不同检测方法在应用过程中还存在有一定的局限性，比如养殖场或者疫情爆发地就可以采用胶体金诊断试纸来进行禽流感病毒的筛选工作，从而满足禽流感病毒检测工作的具体需求。因此在实际工作中还需要结合当地情况，进行检测方法的合理选择，促进我国养殖行业得到更进一步的发展。
参考文献：
[1]王璟.禽流感病毒检测方法研究进展[J].畜禽业，2018，29（11）：19，21.
[2]王潇，曹琛福，黄超华， 等.禽流感病毒H7亚型RT-exoRPA检测方法的建立[J].动物医学进展，2018，39（11）：1-7.
[3]张杰，任宝红，娄亚坤， 等.禽流感病毒H7N9亚型三重荧光PCR检测方法研究[J].畜禽业，2018，29（9）：1-2.
作者简介：余新玲（1977-07-）女，河南确山人，本科，中级兽医师。工作内容及方向：动物检疫及动物卫生监督执法。
关键词：禽流感;病毒检测;方法
禽流感病毒属于正黏病毒科的一种，可以引起禽类呼吸系统到严重全身败血症等多种病症，并能够直接感染到人体。此外禽流感病毒有着非常强的变异性，若未在第一时间内得到有效的干预控制，还会造成非常严重经济损失跟社会损失。我国作为一个人口大国，高致病性的禽流感对于人民的健康安全跟国民经济均会造成非常大的威胁，也就需要加强对禽流感病毒检测方法的不断强化与完善，来获得良好的禽流感防控效果。
一、血清学检测
1.血凝实验跟血凝抑制实验
该试验方法作为WHO在全球范围内常用的一种禽流感检测方法，也是我国现阶段禽流感检测工作中的常见检测手段。在进行禽流感病毒的检测过程中，采用血凝实验方法具备有特异性高以及操作简便的应用优势，但是在检测过程中需要进行NDV等病毒的排除，对于病毒种类也无法进行直接的检测。这样就容易出现假阳性的检测结果，使得禽流感检测的准确性无法得到有效保障。
2.酶联免疫吸附试验
在禽流感病毒检测过程中采用酶联免疫吸附法，还有这面感性高的特征，对于抗原跟抗体均能够起到良好的检测效果，因此在大批血清样本的检测过程中也获得了广泛的应用。近年来我国的ELISA检测技术得到了迅速的发展，诊断时间以及诊断试剂也得到了一定程度的优化。相关研究人员采用昆虫杆状病毒表达系统所制定的禽流感病毒HA蛋白，能够对该类型的禽流感病毒起到良好的检测效果，还具有非常高的重复性跟稳定性。
3.电化学发光免疫法
元文宝等研究人员选用了钌联吡啶对H9亚型AIV的单克隆抗体进行标记，并对生物素化多抗的最佳工作浓度进行了优化，进行了临界点跟反应谱的确定，对构建完成的方向进行了试验，结果表明采用电化学发光免疫法能够对临床上的禽流感病毒起到良好的检测效果，对于H9亚型禽流感病毒的监测以及防控工作也有着非常积极的意义。所有相关研究人员还需要加强对该方面的重视力度，为我国的禽流感病毒检测工作提供一定的帮助。
4.纳米荧光检测方法
为了实现对禽流感病毒的有效检测，相关研究人员还采用纳米荧光方法进行了H9亚型AIV的检测体系，结果表明该类型的禽流感病毒在纳米荧光检测模式中能够获得良好的检测效果。此外构建完成的H9亚型纳米荧光检测具备有良好的检测特异性，跟其他的亚型AIV病毒也无交叉性，检测结果准确，可以在H9亚型禽流感病毒的检测工作中得到有效应用。
二、分子生物学诊断方法
1.多重PCR检测法
在结合GenBank上已经登录的AIV的M基因以及NDV的F基因所合成的2对引物，能够采用优化反應条件的模式，来对这几种禽流感病毒进行PCR检测，并且就该检测方法的敏感性、重复性以及特异性进行了检验。结果表明通过多重PCR检测法的应用，能够对这两种病毒起到迅速准确的鉴别效果，并能够在临床上完成这两种病原的鉴别诊断工作，因此值得在临床诊断上进行应用跟推广。
2.实时荧光定量PCR
该检测方法是在DNA扩增反应中，采用荧光物质对每次的PCR循环产物量进行测定，在此基础上进行禽流感病毒的检测工作。通过对NCBL数据库中的亚型AIV的HA基因序列进行分析，在此基础上进行特异性引物的针对性设定，随后构建针对该禽流感病毒的荧光定量PCR检测方法，能够对该禽流感病毒起到良好的诊断效果。相关研究表明采用实时荧光定量PCR检测法，还具备有非常高的检测敏感度，对于各种AIV病毒的检测也能够提供良好的技术支持，还可以实现对外来AIV的有效监测，避免禽流感病毒所造成的各种影响。
3.环介导等温扩增技术
该技术在测定过程中不需要采用大型的仪器设备，并且具备有操作简单、成本低廉以及检测速度快的应用优势。跟常规分子生物学方法进行对比，该办法具备有更高的灵敏性以及特异性，适合在基层的兽医实验室以及养殖场内进行应用跟推广。此外在该反应体系中，还能够采用优选的冻干保护剂来进行冷冻干燥处理，并且可以直接进行试剂盒的制作，对后续的检验工作提供良好的帮助。
三、结语
近年来我国的禽流感病毒检测技术得到了迅速的发展，禽流感检测手段也变得越来越多。但是不同检测方法在应用过程中还存在有一定的局限性，比如养殖场或者疫情爆发地就可以采用胶体金诊断试纸来进行禽流感病毒的筛选工作，从而满足禽流感病毒检测工作的具体需求。因此在实际工作中还需要结合当地情况，进行检测方法的合理选择，促进我国养殖行业得到更进一步的发展。
参考文献：
[1]王璟.禽流感病毒检测方法研究进展[J].畜禽业，2018，29（11）：19，21.
[2]王潇，曹琛福，黄超华， 等.禽流感病毒H7亚型RT-exoRPA检测方法的建立[J].动物医学进展，2018，39（11）：1-7.
[3]张杰，任宝红，娄亚坤， 等.禽流感病毒H7N9亚型三重荧光PCR检测方法研究[J].畜禽业，2018，29（9）：1-2.
作者简介：余新玲（1977-07-）女，河南确山人，本科，中级兽医师。工作内容及方向：动物检疫及动物卫生监督执法。