柿和君迁子SSR分析技术的建立

来源 :农业生物技术学报 | 被引量 : 0次 | 上传用户：qiucanyu0532

【摘要】

：

通过搜寻核酸数据库中柿属植物核苷酸序列，利用Sputnik程序查找微卫星，利用Primer Premier5．0软件设计特异微卫星引物，并对影响PCR扩增的Mg^2+．dNTPs、Taq DNA聚合酶、引物浓度，以

【作者】

：

郭大龙罗正荣

【机构】

：

华中农业大学园艺植物生物学教育部重点实验室

【出处】

：

农业生物技术学报

【发表日期】

：

2004年4期

【关键词】

：

君迁子分析技术 SSR DNA聚合酶最佳反应体系 Buffer 退火温度核苷酸序列核酸数据库微卫星引物 Mg^2+ PCR扩增柿属植物软件设计引

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通过搜寻核酸数据库中柿属植物核苷酸序列，利用Sputnik程序查找微卫星，利用Primer Premier5．0软件设计特异微卫星引物，并对影响PCR扩增的Mg^2+．dNTPs、Taq DNA聚合酶、引物浓度，以及退火温度等因素进行优化。最终确定柿(Diospyros kaki)和君迁子(D．lotus)SSR-PCR最佳反应体系为：模板DNA30ng，Buffer 1×，Mg^2+2．5mmol／L，dNTPs 0．2mmol／L，TaqDNA酶1U，引物0．3μmol／L，反应总体积20μ

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