日本血吸虫成虫噬菌体展示cDNA文库的构建

来源 :中国寄生虫学与寄生虫病杂志 | 被引量 : 0次 | 上传用户：ruoxich

【摘要】

：

目的构建日本血吸虫成虫T7噬菌体展示cDNA文库。方法用Trizol试剂提取日本血吸虫成虫总RNA，分离纯化mRNA，经随机引物反转录合成双链cDNA。在双链cDNA末端加上定向EcoR Ⅰ／HindⅢ

【作者】

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孙毅贾人初刘金明苑纯秀石耀军陆珂傅志强孙焕蔡

【机构】

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中国农业科学院上海兽医研究所、国家防治动物血吸虫病专业实验室、农业部动物寄生虫学重点开放实验室

【出处】

：

中国寄生虫学与寄生虫病杂志

【发表日期】

：

2007年5期

【关键词】

：

日本血吸虫噬菌体展示cDNA文库成虫 Schistosoma japonicum Phage display eDNA library Adult worm

【基金项目】

：

上海市科学技术委员会科研计划项目（No.054909002）,科技部自然资源平台项目（No.2005DKA21104）致谢本研究得到了中国农业科学院上海兽医研究所血吸虫病研究室、动物生物技术研究中心的其他老师和在读研究生的鼎力帮助,在此表示衷心感谢.

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目的构建日本血吸虫成虫T7噬菌体展示cDNA文库。方法用Trizol试剂提取日本血吸虫成虫总RNA，分离纯化mRNA，经随机引物反转录合成双链cDNA。在双链cDNA末端加上定向EcoR Ⅰ／HindⅢ接头．再用EcoRⅠ和HindⅢ消化，使其成为两端分别带有EcoRⅠ和HindⅢ粘性末端的双链cDNA。收集300bD以上的双链cDNA片段，与T7 Select 10-3b载体连接，经体外包装后，以大肠埃希菌BLT5403为宿主菌构建r丌噬菌体展示cDNA文库。通过滴度测定及PCR技术鉴定文库质量，用7种

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