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利用环境样品16SrRNA克隆测序等许多非培养(culture-independent)研究表明,自然界存在许多独特而难培养未培养的微生物,如何开发更多的微生物资源成为当前重要的课题,本文综述了影响分离得到难培养微生物的主要原因,介绍了当前出现的已经证实卓有成效的新型培养基及培养方法,旨在为研究开发更多创新的培养方法提供参考借鉴。