【摘 要】
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目的 探讨p38/c-Jun氨基末端激酶（JNK）丝裂原活化蛋白激酶（MAPK）信号通路对邻苯二甲酸单（2-乙基己基）酯[mono（2-ethylhexyl）phthalate,MEHP]致小鼠睾丸间质（TM-3）细胞凋亡的影响及其作用机制。方法 将对数生长期的TM-3细胞分别暴露于p38抑制剂SB203580 (5、10、20、40μmol·L-1)、JNK抑制剂SP600125(2.5、5、1
【机 构】
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宁夏医科大学公共卫生与管理学院职业卫生与环境卫生学系宁夏环境因素与慢性病控制重点实验室生育力保持教育部重点实验室
【基金项目】
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2021年宁夏医科大学优势学科群建设项目； 宁夏自然科学基金项目（2021AAC03163）； 宁夏医科大学校级科研基金项目（XM2020008）；
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目的 探讨p38/c-Jun氨基末端激酶（JNK）丝裂原活化蛋白激酶（MAPK）信号通路对邻苯二甲酸单（2-乙基己基）酯[mono（2-ethylhexyl）phthalate,MEHP]致小鼠睾丸间质（TM-3）细胞凋亡的影响及其作用机制。方法 将对数生长期的TM-3细胞分别暴露于p38抑制剂SB203580 (5、10、20、40μmol·L-1)、JNK抑制剂SP600125(2.5、5、10、20μmol·L-1)24 h后，采用CCK-8法检测细胞活性，确定后续SB203580及SP600125干预组染毒剂量；将TM-3细胞分别暴露于0、200、400、800μmol·L-1MEHP、10μmol·L-1SB203580+400μmol·L-1MEHP和10μmol·L-1SP600125+400μmol·L-1MEHP溶液24 h后，光镜下观察细胞形态；CCK-8法检测细胞活性；Annexin V-FITC/PI法检测细胞凋亡情况；荧光探针DCFH-DA法检测细胞活性氧（ROS）水平；免疫印迹法（Western blot）检测细胞p38、p-p38、JNK、p-JNK、Caspase-3和Caspase-9蛋白表达水平。结果 与对照组相比，200、400、800μmol·L-1MEHP剂量组ROS水平、凋亡率均升高（P均＜0.05），细胞内p38和JNK蛋白表达水平差异均无统计学意义（P均＞0.05），蛋白p-p38、p-JNK、Caspase-9和Caspase-3表达均增高（P均＜0.05），且随着MEHP染毒剂量的升高，增高越明显（P均＜0.05）。与400μmol·L-1MEHP剂量组相比，SB203580干预组和SP600125干预组贴壁细胞数量增多，细胞间隙减小，细胞增殖率上升，细胞凋亡率和ROS水平均降低（P均＜0.05）,p38和JNK蛋白表达差异均无统计学意义（P均＞0.05）,p-p38、p-JNK、Caspase-9和Caspase-3蛋白表达均减少（P均＜0.05）。结论 MEHP可通过激活p38/JNK MAPK信号通路诱导TM-3细胞凋亡。
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