【摘 要】
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目的构建促凋亡基因Bad真核表达载体并鉴定其在人食管鳞癌细胞ECA109和KYSE450细胞中的表达。方法设计Bad基因引物,通过PCR扩增获得其cDNA片段,经双酶切后,将此片段克隆至真
【机 构】
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新疆医科大学基础医学院,新疆医科大学附属肿瘤医院
【基金项目】
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国家自然科学基金（81360304）
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目的构建促凋亡基因Bad真核表达载体并鉴定其在人食管鳞癌细胞ECA109和KYSE450细胞中的表达。方法设计Bad基因引物,通过PCR扩增获得其cDNA片段,经双酶切后,将此片段克隆至真核表达载体GV142中,转入DH5α,获得重组质粒GV142-Bad;PCR扩增、酶切及测序验证后,将其及对照空载体转染人食管鳞癌ECA109和KYSE450细胞,转染后24h,通过荧光倒置显微镜观察细胞中绿色荧光信号的表达情况,提取总RNA,使用qPCR检测Bad在转录水平的表达。结果成功构建Bad真核表达载体,PCR
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