论文部分内容阅读
目的：人工构建TALEN靶向敲除载体敲除gata4基因，建立斑马鱼先天性心脏病动物模型。方法采用单元组装法构建靶向敲除gata4基因的载体，将其体外转录成TALEN mRNAs，通过显微注射的方式注入单细胞期受精卵中，胚胎检测TALEN的敲除效率，再通过剪尾、酶切、测序筛选发生基因突变的斑马鱼及突变的类型。结果酶切、测序结果证实成功构建出正确的 gata4靶向敲除载体，注入斑马鱼受精卵中，发生基因敲除的效率为35．18％，通过剪尾、PCR、酶切检测成功地筛选出了发生基因突变的斑马鱼，测序结果显示出不同种类