二甲双胍对人肝癌Hep-G2细胞表皮生长因子及其受体表达的影响

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目的 观察二甲双胍对人肝癌Hep-G2细胞表皮生长因子(EGF)及其受体(EGFR)的影响.方法 体外培养人肝癌Hep-G2细胞,用不同浓度二甲双胍进行干预,3-(4,5-二甲基噻唑-2)-2,5-二苯基四氨唑溴盐法检测二甲双胍对Hep-G2细胞生长的影响;Hoechst 33342染色荧光显微镜观察细胞的形态学变化,流式细胞术观察细胞凋亡;蛋白质印迹法(Western blot)检测EGF、EGFR的表达.结果 二甲双胍对肝癌细胞的活性具有明显的抑制作用,且呈剂量依赖性;以10 mmol/L作用终浓度抑制效果最明显,其48 h的细胞吸光度为(0.477 ±0.025),与对照组(0.602±0.026)比较差异有统计学意义(P<0.01);逐渐增加二甲双胍的作用浓度,细胞凋亡率随之逐渐增加,药物组细胞凋亡率分别为(10.76±0.96)%、(20.77±1.16)%,与对照组(5.21±0.13)%相比差异均有统计学意义(P<0.05);Hoechst33342染色可见明显的细胞皱缩,核染色质浓缩,核碎裂等凋亡形态学变化;Western blot结果显示,EGF及其受体蛋白的表达随着二甲双胍作用浓度的增加而逐渐下调.结论 在体外,二甲双胍能够抑制人肝癌Hep-G2细胞增殖及诱导细胞凋亡,其抗肿瘤机制可能与细胞内EGF及EGFR表达下调有关.
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