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目的:建立96孔板微生物法检测叶酸实验方法,并对该法进行方法学及应用评价.方法:按照AOAC对单一实验性能评价的指导原则,采用96孔板微生物法测定标准参考物质和健康人血浆,得到准确度、精密度、不同稀释倍数检测值的波动范围等指标.结果:标准曲线下可检测叶酸浓度范围为0.025 μg/L~0.05 μg/L;SRM的测定结果与真值的相对误差为2.07%~5.36%;回收率为107%~120%;室内批内差异为4.32%~7.86%,批间差异为3.05%~8.08%;HORRAT值为0.25~0.32;不同稀释倍数下检测结果均在可接受范围内;本法与化学发光法检测结果高度相关(r=0.96).结论:96孔板微生物法检测血浆叶酸具有较好的准确度、精密度和稳定性.因其成本低廉、样品预处理简单、对设备要求不高等优点,适用于大规模人群流行病学研究.