用改良的基因免疫方法制备小鼠抗人OAT3多克隆抗体

来源 :中国现代医学杂志 | 被引量 : 0次 | 上传用户：byekao

【摘要】

：

目的用改良的基因免疫的方法制备小鼠抗人有机阴离子转运蛋白3（hOAT3）多克隆抗体。方法提取人肾组织总RNA，用反转录-聚合酶链反应（RT-PCR）方法扩增hOAT3基因中免疫原性较强的细胞

【作者】

：

许国双刘安

【机构】

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第四军医大学西京医院肾脏病科,西安市儿童医院急诊科

【出处】

：

中国现代医学杂志

【发表日期】

：

2007年15期

【关键词】

：

肾脏有机阴离子转运蛋白3 小鼠基因免疫抗体制备 kidney human organic anion transporter 3 mice genetic

【基金项目】

：

笔者非常感谢美国Texas大学达拉斯西南医学中心Chambers RS博士惠赠质粒pBQAP-0VA、pCMVi-GMCSF、pCMVi-Fit3L,感谢晶美生物公司北京分公司刘雪松教授惠赠HRP标记的抗小鼠IgG1、IgG2a、IgG2b和IgM抗体.

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目的用改良的基因免疫的方法制备小鼠抗人有机阴离子转运蛋白3（hOAT3）多克隆抗体。方法提取人肾组织总RNA，用反转录-聚合酶链反应（RT-PCR）方法扩增hOAT3基因中免疫原性较强的细胞内亲水序列片段，克隆到T-A克隆载体pCR2．1中构建pCR2．1-hOAT3载体，再从pCR2．1-hOAT3中用特异性内切酶Bcl I和Xma I切下hOAT3基因片段，亚克隆到载体pBQAP—TT中构建基因免疫载体pBQAP-TT-hOAT3，酶切及序列分析鉴定正确后。用基因枪与辅助载体pCMVi—GMCSF和p

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