人趋化因子MIP-3α的原核可溶性表达及趋化活性分析

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目的:克隆人趋化因子MIP-3α,进行原核表达并初步鉴定其趋化活性.方法:从人扁桃体中提取总RNA,进行RT-PCR,扩增MIP-3α成熟蛋白基因,重组于pET32a(+)载体,转化大肠杆菌BL21TrxB(DE3),进行融合表达,Western blot验证融合蛋白,金属离子亲和层析,肠激酶酶切,弱阳离子交换层析,得到纯化的MIP-3α蛋白,趋化试验鉴定其趋化活性.结果:成功构建了MIP-3α天然蛋白的硫氧还蛋白融合表达载体,表达并纯化出MIP-3α蛋白,Western blot证明融合蛋白能与羊抗人M
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