【摘 要】
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目的 探讨miR-491-5p对人膀胱癌细胞系EJ 5-氟尿嘧啶(5-fluorouracil,5-FU)敏感性的影响及初步机制.方法 RT-qPCR检测miR-491-5p在膀胱癌化疗敏感与耐药组织中表达水平.构建5
【机 构】
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湖南省人民医院 药学二部,湖南 长沙410002
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目的 探讨miR-491-5p对人膀胱癌细胞系EJ 5-氟尿嘧啶(5-fluorouracil,5-FU)敏感性的影响及初步机制.方法 RT-qPCR检测miR-491-5p在膀胱癌化疗敏感与耐药组织中表达水平.构建5-FU耐药的EJ/5-FU细胞系,并分别用RT-qPCR和Western blot检测miR-491-5p表达和AKT与STAT3磷酸化水平.将miR-491-5p抑制剂转入细胞系EJ或将miR-491-5p模拟物转入EJ/5-FU细胞,并在5-FU存在的条件下分别用CCK-8法、Annexin V-FITC/PI染色法、划痕法、Transwell小室法和Western blot检测细胞活性、凋亡、伤口愈合、迁移、侵袭和AKT与STAT3磷酸化水平.结果 miR-491-5p在化疗耐药组织和EJ/5-FU细胞系中表达显著降低(P<0.01).下调miR-491-5p表达后,5-FU对细胞系EJ的细胞活性、伤口愈合、迁移和侵袭的抑制作用和凋亡的促进作用均显著减弱(P<0.01);上调miR-491-5p表达后,5-FU对EJ/5-FU细胞系的细胞活性、伤口愈合、迁移和侵袭的抑制作用和凋亡的促进作用均显著增加(P<0.01).AKT及STAT3磷酸化水平在EJ/5-FU细胞系中显著升高(P<0.01);下调miR-491-5p后,细胞系EJ中AKT及STAT3磷酸化水平显著升高(P<0.01);上调miR-491-5p后,EJ/5-FU细胞系中AKT及STAT3磷酸化水平显著降低(P<0.01).结论 下调miR-491-5p表达降低细胞系EJ对5-FU的敏感性;上调miR-491-5p表达抑制EJ/5-FU细胞系对5-FU耐药性.miR-491-5p调节细胞系EJ 5-FU耐药性的过程中伴随着AKT及STAT3磷酸化的改变.
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