【摘 要】
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目的：基于GRP78/PERK/ATF4通路探讨泽泻汤改善肝细胞内质网应激的潜在机制。方法：采用油酸（OA）及高脂饮食诱导高脂细胞及动物内质网应激（Endoplasmic reticulum stress，ERS）模型。ER与Ca2+荧光共定位观察泽泻汤对ER-Ca2+稳态的调节情况；流式细胞术及Tunel法检测泽泻汤对凋亡的影响；Western bolt法检测葡萄糖调节蛋白78/B细胞免疫球蛋白
【基金项目】
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国家自然科学基金项目（82004019，82174267）； 河南省高校科技创新团队支持计划项目（21IRTSTHN026）； 河南省高校科技创新人才支持计划资助（22HASTIT048）； 河南省高等学校青年骨干教师（2021GGJS081）；
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目的：基于GRP78/PERK/ATF4通路探讨泽泻汤改善肝细胞内质网应激的潜在机制。方法：采用油酸（OA）及高脂饮食诱导高脂细胞及动物内质网应激（Endoplasmic reticulum stress，ERS）模型。ER与Ca2+荧光共定位观察泽泻汤对ER-Ca2+稳态的调节情况；流式细胞术及Tunel法检测泽泻汤对凋亡的影响；Western bolt法检测葡萄糖调节蛋白78/B细胞免疫球蛋白结合蛋白（GRP78/BIP）GRP78、类PKR的内质网激酶（PERK）、p-PERK和转录激活因子4（ATF4）的蛋白表达；Q-PCR检测ER核心信号1（Ern1）、转录激活因子6（Atf6）、CCAAT/增强子结合蛋白同源蛋白（CCAAT/enhancer-binding protein-homologous protein，Chop）、Grp78、Perk、X-盒结合蛋白1（Xbp1）、热休克蛋白90β1（Hsp90β1）、肿瘤坏死因子受体超家族成员10B（Tnfrsf10b）的mRNA表达。结果：与正常对照组相比，模型对照组ER-Ca2+失衡（P＜0.05），肝细胞凋亡增加（P＜0.01），ERS伴侣标志蛋白GRP78表达显著上调（P＜0.05），同时ATF4蛋白表达显著上调（P＜0.05），并上调了Perk、Xbp1等ERS相关mRNA的表达（P＜0.05）；与模型对照组相比，泽泻汤逆转了OA诱导的ER-Ca2+失衡（P＜0.01）；有效改善OA及HFD诱导肝细胞凋亡（P＜0.01）；体内外逆转OA及HFD诱导ERS伴侣标志蛋白GRP78表达的显著上调（P＜0.01），同时下调p-PERK及ATF4蛋白表达（P＜0.05）；并能体内外下调ERS相关基因Ern1、Atf6、Chop、Grp78、Perk、Xbp1、Hsp90b1、Tnfrsf10b的mRNA表达（P＜0.05）。结论：泽泻汤抑制脂质诱导的ERS，其机制可能与调控GRP78/PERK/ATF4通路有关。
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