以紫花苜蓿为研究对象,采用非靶向代谢组学方法,利用液相色谱电离串联质谱(LC-ESI-MS)分析不同生育时期苜蓿叶片中代谢物的变化。采用XCMS程序处理原始数据,然后应用软件SIMCA-P 14.1进行模式识别。通过正交偏最小二乘法判别分析(OPLS-DA)方法与单变量统计分析,以OPLS-DA模型VIP>1且T检验P值<0.05为筛选标准,筛选显著性差异代谢物。结果发现共27个代谢物发生显著变化,11种表达下调,16种表达上调。其中,L-谷氨酸、嘌呤、嘧啶等与粗蛋白质含量相关的代谢产物在现蕾期到中花期主要表现为下调,L-苯丙氨酸及糖类等与木质素和半纤维素合成相关的代谢产物主要表现为上调,共同导致粗蛋白质含量降低,中性洗涤纤维、酸性洗涤纤维含量增加,苜蓿的营养品质及相对饲喂价值下降。此外,乳酸及一些可溶性碳水化合物含量在中花期相对于现蕾期表现为上调,因此,中花期收获的苜蓿更宜青贮,而现蕾期收获的苜蓿粗蛋白质含量较高,更宜调制干草。