目的分析大鼠气管内注入博来霉素(BLMS)后,观察不同时间点移入骨髓间充质干细胞(MSC)的分化行为,分析细胞因子表达规律及其与病理变化的相关性,确定MSC移植治疗实验性肺纤维化大鼠的最佳时间窗及标准,旨在为临床上干细胞移植治疗肺纤维化的时机提供可靠参考依据。方法体外分离和培养雄性Wistar大鼠的MSC。将60只雌性Wistar大鼠随机分为4组:A组为生理盐水对照组,气管内注入PBS50μL;B组为博来霉素模型组,向气管内注入BLMS 5mg/kg;C组气管内注入BLMS后立即尾静脉注射移植MSC 1×10~7/mL,200μL;D组气管内注入BLMS 14d后移植MSC 1×107/mL,200μL。于实验7d、14d、28d(D组于28d)分别处死大鼠5只,取肺组织病理切片行HE及Masson染色,观察肺部炎症和纤维化情况及羟脯氨酸(HYP)含量测定;提取肺组织通过聚合酶链反应(PCR)检测雄性鼠的性别决定基因(SRY);提取肺组织免疫组织化学法检测转化生长因子-β1(TGF-β1)蛋白表达。结果病理切片观察:B组第7天肺泡炎最明显,28d时肺纤维化最严重,与其他3组比较有统计学意义(P<0.05或P<0.01);C组、D组肺泡炎及肺纤维化程度均较B组显著减轻(P<0.05),但仍较A组严重(P<0.05或P<0.01),其中D组较C组严重(P<0.05)。Y染色体性别决定区SRY基因的检测:A组及B组检测不到SRY基因,但C组和D组各时间点均能检测到SRY基因。HYP含量:B组第7天HYP含量开始升高,28d达到最高峰,高于其他3组(P<0.05或P<0.01),与A组相比各时间点HYP含量的差异均具有统计学意义(P<0.01);C组与D组大鼠HYP含量均呈低水平升高趋势,造模后7d、14d、28dHYP含量均显著低于B组(P<0.05)。TGF-β1:B组TGF-β1在14d时表达最高,28d时逐渐下降,各组之间比较均有统计学意义(P<0.05)。结论气管内注入博来霉素可成功复制大鼠肺纤维化模型;MSC可减轻肺泡炎、肺纤维化的程度;MSC到达损伤肺后可能抑制TGF-β1的表达,从而抑制博来霉素诱导肺纤维化的形成。