【摘 要】
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目的 探索尖吻蝮蛇毒组分Ⅰ(AAVC-Ⅰ)在人口腔鳞状细胞癌中促进细胞凋亡的作用及对自噬的影响. 方法 将所培养的人口腔鳞癌HN4细胞随机分为4组:对照组,AAVC-Ⅰ低浓度组(2.5μ
【机 构】
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皖南医学院病理生理教研室,芜湖,241002;皖南医学院口腔医学院,芜湖,241002
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目的 探索尖吻蝮蛇毒组分Ⅰ(AAVC-Ⅰ)在人口腔鳞状细胞癌中促进细胞凋亡的作用及对自噬的影响. 方法 将所培养的人口腔鳞癌HN4细胞随机分为4组:对照组,AAVC-Ⅰ低浓度组(2.5μg/mL),AAVC-Ⅰ中浓度组(5μg/mL),AAVC-Ⅰ高浓度组(10 μg/mL).将尖吻蝮蛇毒组分Ⅰ冻干粉溶于培养基中,在肿瘤细胞的对数生长期加入不同浓度AAVC-Ⅰ,对照组给予相应剂量的溶剂,24 h后取标本,MTT检测肿瘤细胞的抑制率,流式细胞仪检测细胞凋亡情况,Western blot及免疫组织化学染色法检测Caspase-3蛋白的表达情况,采用JC-1试剂盒检测线粒体膜电位,免疫荧光法检测自噬微管相关蛋白轻链3(LC3)蛋白的表达. 结果 与对照组相比,给予AAVC-Ⅰ低、中、高不同浓度干预后,肿瘤细胞的增殖受抑制(P＜0.05),细胞凋亡率增加(P＜0.01),肿瘤细胞Caspase-3表达量增加(P＜0.05),线粒体膜电位下降(P＜0.05),免疫荧光显示LC3的表达量增加(P＜0.05),并呈浓度依赖性. 结论 AAVC-Ⅰ可以抑制口腔鳞状细胞癌HN4细胞的增殖,可能机制为线粒体膜电位改变及Caspase-3蛋白的表达增加有关,同时AAVC-Ⅰ增加自噬活性.
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