【摘 要】
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目的探寻水通道蛋白5(Aquaporin 5,AQP5)对小鼠骨髓间充质干细胞分化能力的影响。方法采用RT-PCR和Western Blot方法检测AQP5在小鼠骨髓间充质干细胞(BMSCs)中的表达。定向诱
【机 构】
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中国医科大学转化医学研究院教育部医学细胞生物学重点实验室;
【基金项目】
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国家自然科学基金(81502414);教育部“创新团队发展计划”(RT13101)
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目的探寻水通道蛋白5(Aquaporin 5,AQP5)对小鼠骨髓间充质干细胞分化能力的影响。方法采用RT-PCR和Western Blot方法检测AQP5在小鼠骨髓间充质干细胞(BMSCs)中的表达。定向诱导BMSCs后分别进行油红O染色(成脂),茜素红S和碱性磷酸酶染色(成骨),Collagen II和番红素O染色(成软骨)。检测钙离子、碱性磷酸酶和胞外糖胺多糖含量,Real-time PCR检测成脂、成骨和成软骨分化后的特异标记分子的相对+/+m RNA表达。结果 RT-PCR和Western Blot结果发现野生型(AQP5)BMSCs中有AQP5阳性条带。油红O、茜素红S、碱-/-性磷酸酶,Collagen II和番红素O染色阳性染色率在AQP5敲除型(AQP5)BMSCs明显高于野生型。Real-time PCR结果证-/-实AQP5 BMSCs在成脂、成骨和成软骨分化特异标记分子的相对m RNA表达水平显著提高。结论小鼠BMSCs中有AQP5表达,AQP5敲除显著提高BMSCs的成脂、成骨和成软骨分化能力。
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