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目的:构建携带V60,G87,L97突变位点的HBV全基因组真核细胞表达载体,转染慢性HBV感染者永生化B淋巴母细胞系(LCL),建立相同HLA背景下的慢性HBV感染CTL应答的刺激细胞和靶细胞.方法:用定点突变技术在HBVp3.8Ⅱ质粒C基因区3个氨基酸V60,G87,L97位置进行突变(p3.8Ⅱ-V60,G87,L97),转化E.coli XL1-Blue感受态细胞扩增筛选,用限制性内切酶SacⅠ和Kpen Ⅰ分别将野生型和突变型p3.8Ⅱ质粒进行双酶切,插入EBO-plPP真核细胞表达载体,转染L