抗菌肽SMAP-29在毕赤酵母中的表达

来源 :石河子大学学报:自然科学版 | 被引量 : 0次 | 上传用户：minisnake1

【摘要】

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依据毕赤酵母密码子偏好性，设计合成抗菌肽SMAP-29成熟肽基因片段，克隆到表达载体pPIC3．5．K上，SalI线性化后转化毕赤酵母GS115，418抗性筛选高拷贝克隆，再由酵母菌落PCR鉴定；阳性克隆

【作者】

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任耀军薄新文王新华

【机构】

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新疆兵团绵羊繁育生物技术重点实验室,新疆师范大学资产处

【出处】

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石河子大学学报:自然科学版

【发表日期】

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2008年6期

【关键词】

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SMAP-29 毕赤酵母真核表达酵母菌落PCR SMAP-29 Pichia pastoris eukaryotic expression yeas

【基金项目】

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新疆兵团科技局基础研究项目（2006JC01）

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依据毕赤酵母密码子偏好性，设计合成抗菌肽SMAP-29成熟肽基因片段，克隆到表达载体pPIC3．5．K上，SalI线性化后转化毕赤酵母GS115，418抗性筛选高拷贝克隆，再由酵母菌落PCR鉴定；阳性克隆用甲醇诱导表达，Tricine-SDS-PAGE分析，结果在诱导第2d的酵母裂解液中检测到与预期的SMAP-29分子量接近，约3．2kD的诱导表达带；Trizol法提取酵母总RNA，并通过RT-PCR扩增SMAP-29mRNA，发现表达期的酵母细胞中存在SMAP-29mRNA，而对照没有检出，表明SMAP

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