β-羟基丁酸对牦牛脂肪细胞脂肪代谢和脂联素分泌的影响

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本试验旨在探究饥饿状态下β-羟基丁酸(BHBA)对牦牛脂肪细胞脂肪代谢以及脂联素(ADPN)分泌的影响,从细胞水平丰富牦牛脂肪代谢调控理论。采取4头1岁左右的体况相近且健康的雄性麦洼牦牛的脂肪组织,采用酶消化法和鸡尾酒法诱导分化获取牦牛原代脂肪细胞进行培养,通过不同浓度BHBA和血清饥饿共处理后,对其成脂情况、脂肪代谢关键酶表达和ADPN分泌情况进行分析。结果显示:成脂情况表明,饥饿状态下,当BHBA浓度>4 mmol/L时,脂滴油红O染色量化值[光密度(OD)值]显著升高(P<0.05)。脂肪分解代谢关键酶检测发现,饥饿状态下,32 mmol/L BHBA能够显著降低脂酰辅酶A氧化酶(ACOX)和激素敏感脂酶(HSL)的基因表达量和浓度(P<0.05)。脂肪分解代谢相关转录因子检测发现,饥饿状态下,4、8、16、32 mmol/L BHBA均能够显著降低叉头框O蛋白1(FoxO1)的基因和蛋白表达量(P<0.05),但并未出现出剂量依赖效应;4、8、16 mmol/L BHBA能够显著促进过氧化物酶增殖物激活受体α(PPARα)蛋白的表达(P<0.05),但32 mmol/L BHBA则显著抑制PPARα基因和蛋白的表达(P<0.05)。脂肪合成代谢关键酶检测发现,饥饿状态下,32 mmol/L BHBA显著提高乙酰辅酶A羧化酶(ACACA)、二酰基甘油酰基转移酶1(DGAT1)的浓度(P<0.05),而BHBA浓度在8、16和32 mmol/L时,FASN浓度均显著提高(P<0.05)。脂肪合成代谢相关转录因子检测发现,饥饿状态下,32 mmol/L BHBA显著促进了CCAAT增强子结合蛋白α(C/EBPα)的基因表达(P<0.05),4、8、16和32 mmol/L BHBA显著提高了过氧化物酶增殖物激活受体γ(PPARγ)和固醇调节元件结合蛋白1c(SREBP1c)浓度(P<0.05),但未出现剂量依赖效应。ADPN以及G蛋白偶联受体109A(GPR109A)检测发现,经高浓度(32 mmol/L)BHBA处理后,ADPN和GPR109A的基因表达量均出现显著下降(P<0.05),但低浓度BHBA则显著促进其表达(P<0.05)。综上所述,在本试验条件下,32 mmol/L BHBA能够抑制牦牛脂肪细胞的脂肪分解代谢,加强脂肪合成代谢,低浓度的BHBA能够促进牦牛脂肪细胞对ADPN的分泌,而高浓度BHBA(>8 mmol/L)则抑制ADPN的分泌。
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