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建立了兽药中非法添加药物阿托品的超高效液相色谱－串联质谱（ UPLC－MS／MS）的检测方法。样品经提取稀释，采用 BEH C18柱为分离柱，外标法定量。结果表明，阿托品在0．5～10 ng／mL范围内线性关系良好，相关系数大于0．99。在4～6 mg／g（或mg／mL）添加浓度范围内阿托品的平均回收率97．4％～110．9％，批内变异系数均小于10％，检测限为0．2 mg／g（或mg／mL），定量限为0．5 mg／g（或mg／mL）。该方法简便、灵敏度高、重现性好，适用于兽药中非法添加阿托品的含量测定。