【摘 要】
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目的 建立UPLC-MS/MS法测定大鼠肝微粒体中钩吻素子的浓度及其酶促反应动力学研究. 方法 优化钩吻素子与肝微粒体的反应体系,采用UPLC BEH C18色谱柱,流动相为甲醇-水(两者均
【机 构】
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福建中医药大学药学院,福建福州,350122
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目的 建立UPLC-MS/MS法测定大鼠肝微粒体中钩吻素子的浓度及其酶促反应动力学研究. 方法 优化钩吻素子与肝微粒体的反应体系,采用UPLC BEH C18色谱柱,流动相为甲醇-水(两者均含0.1％甲酸),梯度洗脱,流速为0.3 mL/min,进样量为1μL,质谱采用正离子,MRM模式检测孵育体系中钩吻素子的浓度,并应用Linewearve-Burk作图分析数据,计算酶促动力学常数. 结果 钩吻素子在0.5～30μM范围内线性良好,回归方程为y=0.1544x-0.0593(r=0.9939,n=5).钩吻素子的酶促反应动力学参数Km为14.2 μmol/L,Vmax为303.03pmol/(min·mg·pro)以及肝清除率CLinx(Vmax/Km)为21.37 μL/(min·mg·pro). 结论 该方法简单、快速、可靠,适应于钩吻素子的体外代谢研究.
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