未折叠蛋白反应在白内障发病机制中作用的实验探析

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目的进行内质网应激中未折叠蛋白反应在白内障发病机制中的作用关系探析。方法通过分组实验,分别使用不同浓度标准的同型半胱氨酸进行实验检测。其中,使用MTT检测法进行不同浓度药物对于细胞增殖的抑制率作用的检测计算;对于细胞的凋亡率使用Hoechst33258荧光染色方法进行检测实现;而对于刺激后细胞中的活性氧产物则使用活性氧荧光探针DCFH-DA进行检测实现;对于刺激后细胞中还原型谷胱甘肽含量使用 GSH检测试剂盒进行检测实现;对于刺激后细胞中的GRP78与caspase-12的表达,使用Western blot技术进行实验检测应用实现。结果不同浓度的半胱氨酸容易造成晶体上皮细胞活力呈现浓度依赖性下降变化。其次,根据上述实验结果细胞中的活性氧产物呈现浓度依赖性的升高变化,而细胞中的还原型谷胱甘肽含量呈现减少变化,对于 GRP78,caspase-12的表达检测显示呈现升高变化。结论高浓度内质网刺激因子对于晶体上皮细胞具有刺激作用,在这种刺激作用下,不仅能够导致晶体上皮细胞中产生内质网应激,而且还能够通过未折叠蛋白反应造成晶体中上皮细胞的凋亡发生,从而导致产生白内障。
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