论文部分内容阅读
目的构建表达CRT180基因重组的腺病毒载体,为肿瘤的基因治疗奠定实验基础。方法采用腺病毒表达系统(Vira Power^TM Adenoviral Expression System)构建重组腺病毒表达载体。首先利用RT-PCR的方法在人肺腺癌细胞系A549细胞中扩增CRT180基因,以连接、转化等方法克隆入载体pENTR/D—TOPO以获得重组的入门克隆,经测序及PCR鉴定正确后,用重组酶(LRClonase^TMⅡ Enzyme Mix)进行入门克隆与腺病毒表达载体(pAd—CMV/V5-DEST)