【摘 要】
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目的 探讨核因子E2相关因子(nuclear factor E2 related factor,Nrf2)/血红素加氧合酶1(heme oxygenase-1,HO-1)通路是否参与硫化氢(hydrogen sulfide,H2S)减轻心搏骤停大鼠
【机 构】
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南京大学医学院附属金陵医院麻醉科,210002
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目的 探讨核因子E2相关因子(nuclear factor E2 related factor,Nrf2)/血红素加氧合酶1(heme oxygenase-1,HO-1)通路是否参与硫化氢(hydrogen sulfide,H2S)减轻心搏骤停大鼠血脑屏障(blood-brain barrier,BBB)损伤及参与该效应的可能机制. 方法 采用经食管电刺激法建立大鼠心搏骤停心肺复苏(cardiopulmonary resuscitation,CPR)模型,缺血时间4 min.140只成年雄性SD大鼠按随机数字表法分为5组:假手术组(Sham组,20只)、心搏骤停模型组(CPR组,30只)、硫氢化钠(sodium hydrogen sulfide,NaHS)组(30只)、NaHS+溶剂[二甲基亚砜(dimethyl sulfoxide,DMSO)]对照组(NaHS+DMSO组,30只)、NaHS+Nrf2抑制剂维甲酸(retinoic acid,RA)组(NaHS+RA组,30只).Sham组仅进行麻醉,经口气管插管,经股动静脉置管操作,其他4组均行电刺激诱发心搏骤停;NaHS组与NaHS+RA组于自主循环恢复即刻经股静脉注射NaHS(0.5 mg/kg),此后持续泵入NaHS(1.5 mg·kg-1,h-1)3 h;NaHS+RA组于实验前1周每天及复苏即刻腹腔注射RA 10 mg/kg;NaHS+DMSO组于实验前1周每天及复苏即刻腹腔给予等容量溶剂DMSO,CPR组于复苏即刻静脉给予等量生理盐水.复苏成功后连续观察7d,记录大鼠生存情况;于复苏后1、3、7d评价神经功能;于复苏后24 h检测脑含水量、BBB通透性,Western blot法检测Nrf2、HO-1、BBB紧密连接蛋白occludin表达变化,免疫组织化学染色检测基质金属蛋白酶-9(matrix metalloproteinase-9,MMP-9)表达变化.结果 大鼠的生存率、神经功能评分、Nrf2和HO-1表达及occludin表达量比较,NaHS组均高于CPR组(P＜0.05),而NaHS+RA组低于NaHS组(P＜0.05);脑含水量和伊文思蓝(evans blue,EB)含量及MMP-9阳性细胞数比较,NaHS组显著低于CPR组(P＜0.05),而NaHS+RA组较NaHS组增高(P＜0.05).NaHS组与NaHS+DMSO组各项结果比较,差异无统计学意义(P＞0.05). 结论 H2S可减轻心搏骤停大鼠BBB损伤,可能与H2S激活Nrf2/HO-1通路、抑制MMP-9表达、减少Occludin蛋白丢失有关.
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