【摘 要】
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目的:研究RITA对TP53突变的人套细胞淋巴瘤细胞株Mino的作用及其调控机制.方法:体外培养Mino细胞,不同浓度(0-16 μmol/L) RITA作用于Mino细胞24、48、72 h后,采用CCK-8法检测RITA对Mino细胞的增殖抑制作用;0-8 μmol/L浓度RITA作用于Mino细胞48 h,采用Annexin V/PI流式细胞术检测RITA对Mino细胞的凋亡诱导作用,采用Western blot法检测蛋白BCL-2、Caspase-3、Cleaved Caspase-3、PARP、
【机 构】
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广州医科大学附属第二医院血液科,广东广州510260;南方医科大学第三附属医院血液科,广东广州510630;南方医科大学南方医院血液科,广东广州510515;厦门大学附属第一医院血液科,福建厦门361
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目的:研究RITA对TP53突变的人套细胞淋巴瘤细胞株Mino的作用及其调控机制.方法:体外培养Mino细胞,不同浓度(0-16 μmol/L) RITA作用于Mino细胞24、48、72 h后,采用CCK-8法检测RITA对Mino细胞的增殖抑制作用;0-8 μmol/L浓度RITA作用于Mino细胞48 h,采用Annexin V/PI流式细胞术检测RITA对Mino细胞的凋亡诱导作用,采用Western blot法检测蛋白BCL-2、Caspase-3、Cleaved Caspase-3、PARP、MDM2、P53的表达.结果:RITA能显著抑制TP53突变细胞株Mino增殖,经0.5、1、2、4、8、16 μmol/L的RITA作用Mino细胞48 h后,细胞的增殖抑制率分别为(1.2±5.6)％、(14.9±4.9)％、(41.7±5.0)％、(61.8±2.4)％、(70.2±2.8)％和(70.8±2.4)％,随着RITA作用浓度的增加,抑制率也增加(r=0.767).Mino细胞经4μmol/L的RITA作用24、48和72 h后的增殖抑制率分别为(25.2±3.8)％、(61.8±2.4)％和(87.0±0.7)％,随着RITA作用时间增加,抑制率亦增加(r =0.978).细胞凋亡检测结果显示,Mino细胞经0、2、4、8μmol/L的RITA作用48 h后的凋亡率分别为(5.4±0.4)％、(15.3±0.6)％、(38.7±1.7)％和(50.8±1.1)％,随着RITA作用浓度增加,诱导Mino细胞凋亡的作用增强(r =0.961).Western blot检测结果显示,随着RITA浓度的增加,BCL-2蛋白表达下降(r=0.932),出现PARP切割和Caspase-3激活,而MDM2、P53蛋白表达无变化.结论:P53小分子RITA对套细胞淋巴瘤TP53突变细胞株Mino有显著的增殖抑制和诱导凋亡的作用,其机制可能依赖于Caspase途径,而与P53通路无关.
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