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为建立快速特异的定量检测牛轮状病毒（BRV）VP7基因的荧光定量PCR检测方法,本研究设计扩增BRV VP7基因的特异性引物,将扩增的VP7基因片段（342 bp）克隆于pMD18-T载体中（pMD-VP7）,作为重组质粒标准品,建立EvaGreen荧光定量RT-PCR（qRT-PCR）检测方法。经反应条件优化,结果表明该方法的最低检测量为8.03拷贝/μL。该方法对牛病毒性腹泻病毒、牛冠状病毒、猪流行性腹泻病毒及牛结核分枝杆菌的检测结果均为阴性,表明其具有良好的特异性。批内和批间重复变异系数均小于3%。