庆大霉素对猪肾小管上皮细胞凋亡与细胞内钙浓度的影响

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目的 了解中毒性肾病中细胞凋亡的发生机制。方法 用不同浓度的庆大霉素(0.5、1、2、4、8、16mmol/L),作用于体外培养的猪肾小管上皮细胞株(LLC-PK1),观察有无细胞凋亡发生以及细胞凋亡与细胞内Ca2+浓度变化的关系。结果 庆大霉素能引起体外培养的肾小管上皮细胞发生凋亡,该凋亡分别经光镜、电镜、琼脂糖凝胶电泳对DNA片断的测定以及原位细胞死亡检测等方法证实。利用流式细胞仪,定量测定表明,随着庆大霉素浓度的增加(2~16mmol/L),凋亡细胞所占比例也增加(8.8%、10.2%、16.1%、18.3%,P<0.01)。通过激光共聚焦显微镜对细胞内Ca2+浓度的测定,发现庆大霉素组(4mmol/L)平均细胞内Ca2+浓度明显高于正常对照组(P<0.01)。结论 庆大霉素能诱导LLC-PK1细胞凋亡,凋亡的发生与培养液中庆大霉素浓度及作用时间有关,凋亡细胞内Ca2+浓度比正常组显著增加,提示LLC-PK1凋亡的发生与细胞内Ca2+浓度升高有关。

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