人β防御素2(HBD2)与人乳头瘤病毒HPVl6E6羧基端编码基因的克隆及其在真核细胞中的表达

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目的构建人β防御素与人乳头瘤病毒HPV16E6羧基端基因的真核表达质粒,并检测其在真核细胞中的表达情况,探讨其作为DNA疫苗治疗宫颈癌的可行性。方法利用分子克隆技术,将HBD2基因片段与HPV16E6羧基端基因片段连接,插入真核表达质粒pcDNA3.1,经测序鉴定后,用阳离子脂质体法转染真核细胞COS7,RT—PCR及免疫组化法检测其表达。结果重组质粒pcDNA3.1/HBD2~HPV16E6C转染COS7细胞48小时后,RT—PCR扩增出插入的HBD2--HPV16E6C片段,免疫组化染色呈棕黄色阳性反
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