【摘 要】
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目的 探讨降压通络方对缺氧诱导的大鼠肾小管上皮(NRK-52E)细胞凋亡的相关分子机制.方法 制备降压通络方(1.42 g/mL灌胃大鼠)含药血清和缬沙坦(0.83 mg/mL灌胃大鼠)含药血清,采用缺氧诱导大鼠NRK-52E细胞凋亡模型,分为4组:正常组、模型组、降压通络方组和缬沙坦组.采用CCK-8试剂盒检测细胞活力值,Annexin V-FITC/PI双染法检测细胞凋亡率,ELISA法检测细胞上清液转化生长因子β1(TGF-β1)蛋白表达,免疫荧光法检测TGF-βRⅠ、Smad2/3蛋白定位,Wes
【机 构】
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北京中医药大学东方医院,北京100078;北京中医药大学中医学院,北京102488;中国中医科学院中医基础理论研究所,北京100700
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目的 探讨降压通络方对缺氧诱导的大鼠肾小管上皮(NRK-52E)细胞凋亡的相关分子机制.方法 制备降压通络方(1.42 g/mL灌胃大鼠)含药血清和缬沙坦(0.83 mg/mL灌胃大鼠)含药血清,采用缺氧诱导大鼠NRK-52E细胞凋亡模型,分为4组:正常组、模型组、降压通络方组和缬沙坦组.采用CCK-8试剂盒检测细胞活力值,Annexin V-FITC/PI双染法检测细胞凋亡率,ELISA法检测细胞上清液转化生长因子β1(TGF-β1)蛋白表达,免疫荧光法检测TGF-βRⅠ、Smad2/3蛋白定位,Western Blot法检测TGF-βRⅠ、Smad2/3蛋白表达.结果 TGF-βRⅠ、Smad2/3在NRK-52E细胞上广泛表达.与正常组比较,模型组细胞活力值降低(P＜0.01),凋亡率升高(P＜0.01),TGF-β1、TGF-βRⅠ、Smad2/3表达升高(P＜0.01).与模型组比较,降压通络方组和缬沙坦组细胞活力值升高(P＜0.01),凋亡率降低(P＜0.05,P＜0.01),TGF-β1、TGF-βRⅠ、Smad2/3表达降低(P＜0.01,P＜0.05).与缬沙坦组比较,降压通络方组TGF-β1表达升高(P＜0.05),细胞活力值、凋亡率、TGF-βRⅠ和Smad2/3表达比较,差异无统计学意义(P＞0.05).结论 降压通络方能抑制缺氧诱导的NRK-52E细胞凋亡,其作用机制可能是通过抑制TGF-β1/TGF-β RⅠ/Samd2/3信号通路而实现.
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