【摘 要】
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目的 改良酶消化法提取脂肪间充质干细胞（ADSCs）,并探讨诱导其分化为少突胶质前体细胞（OPCs）的可行性，为脱髓鞘疾病治疗种子细胞来源提供有效途径。方法 取SD大鼠腹股沟区脂肪，Ⅰ型胶原酶和胰蛋白酶联合消化法分离培养ADSCs,Ⅰ型胶原酶组作为对照，细胞计数，观察细胞形态。取第3代细胞，流式细胞术检测细胞的表面标志物CD29、CD90和CD45;成脂诱导，油红O染色；利用干细胞分化培养液及OP
【基金项目】
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山东省重点研发计划项目（2019GSF107069）；
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目的 改良酶消化法提取脂肪间充质干细胞（ADSCs）,并探讨诱导其分化为少突胶质前体细胞（OPCs）的可行性，为脱髓鞘疾病治疗种子细胞来源提供有效途径。方法 取SD大鼠腹股沟区脂肪，Ⅰ型胶原酶和胰蛋白酶联合消化法分离培养ADSCs,Ⅰ型胶原酶组作为对照，细胞计数，观察细胞形态。取第3代细胞，流式细胞术检测细胞的表面标志物CD29、CD90和CD45;成脂诱导，油红O染色；利用干细胞分化培养液及OPCs培养液将ADSCs诱导为OPCs,免疫荧光检测α-N-乙酰基神经氨酸α-2、8-唾液酸转移酶1（A2B5）、NG2;利用OPCs培养液继续培养OPCs分化为少突胶质细胞（OLs）。结果 Ⅰ型胶原酶组分离的ADSCs为（9.143±0.5084）×10~7/L,联合酶组为（13.43±0.4809）×10~7/L,联合酶组较Ⅰ型胶原酶组ADSCs数量多，差异有统计学意义（P＜0.05,n=7）;细胞形态观察显示，ADSCs贴壁生长，呈长梭形；流式细胞术检测CD29阳性率为99.8%,CD90阳性率为99.4%,CD45阳性率为0.35%;成脂诱导后倒置光学显微镜下可见脂滴，油红O染色脂滴呈红染；ADSCs向OPCs诱导第16天，A2B5和NG2表达阳性，A2B5阳性率为（87.03±0.94）%,NG2阳性率为（90.07±0.96）%;继续培养OPCs 3 d,其分化为OLs,髓鞘碱性蛋白（MBP）表达阳性。结论 联合酶消化较单独胶原酶消化获取的细胞数量多，分离培养的细胞符合ADSCs的特征，体外可诱导分化为OPCs。
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