一种检测慢病毒滴度的实时荧光定量PCR方法

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目的:建立一种有效、灵敏、准确的慢病毒滴度的分子检测方法。方法:分别构建慢病毒调控元件WPRE和单拷贝基因白蛋白(Alb)基因的重组质粒,紫外吸收法测量后经数学换算得到相应的拷贝数,以梯度稀释质粒为模板,利用基于SYBR Green的荧光定量PCR制作标准曲线,最后将待测样品的Ct值代入标准曲线,根据相应公式计算慢病毒滴度。结果:WPRE元件和Alb基因质粒的标准曲线回归方程分别为y=-4.255x+46.047、y=-2.8735x+35.831,相关系数R2均大于0.99,扩增效率E均大于95%,且熔
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