降钙素基因相关肽真核表达载体pcDNA3.1/CGRP的构建

来源 :杭州师范学院学报(医学版) | 被引量 : 0次 | 上传用户:kooksnake
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目的构建带有大鼠降钙素基因相关肽基因(rCGRP)的重组真核表达载体pcDNA3.1(+)/rCGRP。方法应用Trizol试剂从SD大鼠脑组织提取总RNA,RT—PCR扩增rCGRPeDNA(PCR引物上加上双酶切位点),产物通过Hindm和BamHI酶切、纯化、连接,将目的基因插入真核表达质粒载体peDNA3.1(+),再将重组质粒转化感受态细菌,通过氨苄青霉素抗性筛选阳性克隆,再经PCR、酶切和测序鉴定所得克隆。结果(1)RT-PCR产物电泳分析扩增产物行1%琼脂糖凝胶电泳后可见一条特异的片段,和r
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