丙型肝炎病毒NS5A反式激活蛋白2在大肠埃希菌中表达及生物信息学分析

来源 :中西医结合肝病杂志 | 被引量 : 0次 | 上传用户:gmwzg
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目的:构建丙型肝炎病毒NS5A反式激活蛋白2(NS5ATP2)原核表达载体并诱导其在大肠埃希菌中表达。方法:应用逆转录聚合酶链反应(RT—PCR)技术,以从HepG2细胞提取的mRNA为模板,扩增NS5ATP2目的基因片段,T-A克隆连接到pGEM-T载体,测序正确后将目的片段插入原核表达载体pET-32a(+)中,转化大肠埃希菌BL21(DE3),IPTG诱导NS5ATP2融合蛋白的表达,并通过十二烷基磺酸钠.聚丙烯酰胺凝胶电泳(SDS-PAGE)、Westernblot免疫印迹分析和证实融合蛋白的表达
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