论文部分内容阅读
目的
探讨转化生长因子-β1(TGF-β1)通过诱导乳腺癌细胞上皮-间充质转化(EMT)影响细胞侵袭迁移能力及相关分子机制。
方法5μg/L TGF-β1作用于人乳腺癌细胞株MDA-MB-435S,诱导细胞发生EMT后,应用脂质体2000瞬时转染小干扰RNA(siRNA)沉默Smad2的表达,观察乳腺癌细胞的形态学变化,并通过Western blot检测Smad2静默前后细胞角蛋白、E-钙黏素、α-平滑肌肌动蛋白(α-SMA)、波形蛋白、Smad2、磷酸化Smad2(p-Smad2)的表达变化;通过Transwell实验检测细胞侵袭迁移能力的改变。
结果TGF-β1作用72 h后,乳腺癌细胞株MDA-MB-435S部分细胞由多角形转变为成纤维样细胞形态,间充质细胞标志物α-SMA、波形蛋白表达分别上调了3.86倍和1.17 倍(P< 0.01);上皮细胞标志物细胞角蛋白、E-钙黏素蛋白表达分别下降了63%和70%(P< 0.01), p-Smad2表达明显上调1.2倍(P< 0.01);侵袭的细胞数(79.20±7.35)明显多于空白组(48.93±5.43),差异有统计学意义(P< 0.05)。沉默Smad2的表达后细胞角蛋白表达升高了44%(P< 0.01),波形蛋白表达下降了59%(P<0.01),干扰组细胞侵袭数目(54.34±6.09)显著低于对照组(75.09±4.98),差异有统计学意义(P< 0.05)。
结论体外TGF-β1能够诱导乳腺癌细胞EMT,增强乳腺癌细胞侵袭转移能力;Smad2信号转导通路在乳腺癌细胞EMT中起重要作用。