【摘 要】
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目的:以大肠杆菌为工程菌制备釉丛蛋白,纯化并免疫制备抗血清.方法:用酶切、连接的方法将已克隆至pBluescript KS+载体中的Tuftelin cDNA片段(编码365个氨基酸)用T4 DNA连接
【机 构】
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第四军医大学口腔医学院,咸阳市口腔医院,中科院上海生化细胞所
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目的:以大肠杆菌为工程菌制备釉丛蛋白,纯化并免疫制备抗血清.方法:用酶切、连接的方法将已克隆至pBluescript KS+载体中的Tuftelin cDNA片段(编码365个氨基酸)用T4 DNA连接酶连入载体pPRoEXTMHTc中,转化大肠杆菌,IPTG 诱导.收集菌体,裂解后SDS-PAGE 电泳,表达出分子量Mr 42×103的融合蛋白.割胶后免疫新西兰大白兔,制备抗体.结果:表达出分子量Mr 42×103的融合蛋白与预期一致.8周以后,Western检测抗原抗体特异性及抗体
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