【摘 要】
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目的 体外构建组织工程心脏瓣膜(TEHV),初步探讨内皮细胞黏附生长的分子机制.方法 猪主动脉瓣膜经胰酶-EDTA、表面活性剂、核酸酶处理,去除猪主动脉瓣叶的细胞成分,测定瓣叶
【机 构】
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南京医科大学第一附属医院胸心外科,解放军第九七医院胸心外科,第二军医大学附属长海医院胸心外科
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目的 体外构建组织工程心脏瓣膜(TEHV),初步探讨内皮细胞黏附生长的分子机制.方法 猪主动脉瓣膜经胰酶-EDTA、表面活性剂、核酸酶处理,去除猪主动脉瓣叶的细胞成分,测定瓣叶脱细胞后的生物力学特性;将扩增的人脐静脉血管内皮细胞(HUVECs)种植在瓣叶上,体外静态构建TEHV,观察内皮细胞的生长状态.消化瓣膜内皮细胞,半定量RT-PCR检测内皮细胞整合素β1 mRNA的表达,Western-Blot检测内皮细胞膜上整合素β1蛋白的表达.结果 猪主动脉瓣膜中的细胞成分能完全去除,脱细胞瓣叶的生物力学特性同新鲜瓣叶相比无明显变化;种植的HUVECs在瓣叶表面生长状态良好,长成一层连续的细胞层.瓣膜内皮细胞可检测到整合素β1 mRNA和蛋白的表达.结论 脱细胞猪主动脉瓣膜作为支架,HUVECs做种子细胞可以成功构建TEHV,瓣膜内皮细胞可以表达整合素β1.
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