【摘 要】
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目的 观察曲古抑菌素A(TSA)和卡介苗(BCG)及两者联合对人膀胱癌BIU-87细胞周期及相关基因表达的影响,并探讨其作用机制.方法 采用噻唑蓝(MTT)法检测细胞生长抑制率,流式细胞术检测细胞周期分布的变化,逆转录-聚合酶链反应(RT-PCR)检测细胞p27kip1、细胞周期素(Cyclin) D1 mRNA表达的变化,Western blot检测细胞p27kip1、Cyclin D1蛋白水平
【机 构】
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450052郑州大学第一附属医院泌尿外科,广州军区武汉总医院泌尿外科,华中科技大学同济医学院附属同济医院泌尿外科,广州军区武汉总医院泌尿外科
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目的 观察曲古抑菌素A(TSA)和卡介苗(BCG)及两者联合对人膀胱癌BIU-87细胞周期及相关基因表达的影响,并探讨其作用机制.方法 采用噻唑蓝(MTT)法检测细胞生长抑制率,流式细胞术检测细胞周期分布的变化,逆转录-聚合酶链反应(RT-PCR)检测细胞p27kip1、细胞周期素(Cyclin) D1 mRNA表达的变化,Western blot检测细胞p27kip1、Cyclin D1蛋白水平的变化.结果 TSA和BCG及两者联合应用能明显抑制BIU-87细胞生长,呈时间和剂量依赖,相对中高剂量两者联用表现为协同作用.TSA和BCG能诱导BIU-87细胞G0/G1期阻滞,对照组G0/G1期细胞比例为(44.39±3.42)％,而TSA联合BCG组G0/G1期细胞比例达(78.3±4.12)％(P＜0.05).RT-PCR结果示TSA和BCG及两者联用能显著诱导p27kip1 mRNA的表达和显著抑制Cyclin D1mRNA的表达,两者联合与单用比较差异有统计学意义(P＜0.05);Western blot进一步在蛋白水平证实了上述结果.结论 Cyclin D1的表达下降和p27kip1的表达上调共同使细胞阻滞于G0/G1期,这表明TSA和BCG可通过诱导细胞周期阻滞而发挥体外抗膀胱癌作用,其作用机制可能涉及相关基因p27kip1、Cyclin D1表达的调控。
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