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为建立用于规模化奶牛场测定奶牛粪污及降解产物中雌激素含量的方法。采用高效液相色谱-串联质谱（HPLC-MS/MS）分析牛粪及降解产物中4种雌激素的检出限。结果表明，雌三醇、雌酮、17-β-雌二醇的检出限为2 ng/mL,17-α-雌二醇的检出限为20 ng/mL；加入50μL氘代内标后，奶牛粪污及降解产物样品4种激素的平均回收率为93.6%～145.3%。建立HPLC-MS/MS方法检测某规模化奶牛场不同来源粪污中4种雌激素总检出量，其中哺乳牛、犊牛、发酵床上层的检出量分别为17.00～76.15μg/kg、29.05～37.55μg/kg、23.60μg/kg。