草地贪夜蛾海藻糖合成酶基因的克隆、时空表达谱及对温度胁迫的响应

来源 :昆虫学报 | 被引量 : 0次 | 上传用户:hanpiaofeng
下载到本地 , 更方便阅读
声明 : 本文档内容版权归属内容提供方 , 如果您对本文有版权争议 , 可与客服联系进行内容授权或下架
论文部分内容阅读
[目的]本研究旨在通过克隆草地贪夜蛾Spodoptera frugiperda的海藻糖合成酶(trehalose-6-phosphate synthase)基因SfTPS,分析其在草地贪夜蛾不同发育阶段、不同组织中的表达水平及不同温度胁迫时5龄幼虫中的相对表达量,为进一步探究TPS在草地贪夜蛾生长发育及抗逆应激反应中的功能奠定基础.[方法]运用RT-PCR技术克隆草地贪夜蛾SfTPS的全长编码区,并进行生物信息学分析.运用RT-qPCR技术检测SfTPS在草地贪夜蛾不同发育阶段(卵、1-6龄幼虫、蛹和成虫)、5龄幼虫不同组织(体壁、中肠和脂肪体)中和经短期(2,4和8h)高(35℃)低温(10℃)胁迫后5龄幼虫中的表达变化.[结果]克隆获得2571 bp的草地贪夜蛾TPS cDNA序列,命名为SfTPS(GenBank登录号:MT920672),全长开放阅读框(ORF)长2481 bp,编码的826个氨基酸具有TPS和TPP两个保守结构域.同源比对和系统进化分析表明,昆虫TPS蛋白具有较高的保守性,SfTPS与斜纹夜蛾S.litura的TPS亲缘关系最近,序列一致性达到99.15%.SfTPS中α-螺旋、β-折叠和无规则卷曲占比分别为38.14%,12.23%和48.55%;SfTPS的三级结构为同源二聚体.RT-qPCR结果表明,SfTPS在草地贪夜蛾卵期和1-5龄幼虫期低表达,在6龄幼虫期、蛹期和成虫期高表达,且草地贪夜蛾变态前后SfTPS的表达量变化较大.组织分布结果显示,SfTPS在5龄幼虫脂肪体中表达量最高.草地贪夜蛾5龄幼虫经2~8h低温(10℃)和高温(35℃)胁迫后,SfTPS的相对表达量显著高于对照(25℃),分别为对照的4.43~9.34和2.50~6.03倍.[结论]SfTPS基因在草地贪夜蛾生长发育过程及抵御高低温度胁迫中可能具有重要作用.
其他文献
目的 对抽动障碍患儿外周血淋巴细胞DRD5 mRNA表达进行检测,观察中药祛风止动方治疗对DRD5 mRNA表达的影响.方法 选取100例抽动障碍患儿作为研究对象(抽动障碍组),以50名相应年龄的健康儿童青少年作为对照(正常对照组).采用实时荧光PCR方法,分别检测2组人群及抽动障碍组的中、重度患儿在祛风止动方治疗前后的外周血淋巴细胞DRD5 mRNA表达水平.结果 按照年龄段将入组儿童青少年分为学龄前期(<7岁)和学龄期(≥7岁)分别进行分析.学龄前期和学龄期抽动障碍组外周血淋巴细胞DRD5 mRNA的
目的 了解儿科医师对维生素A缺乏的认知及维生素A补充剂的应用现状,并分析影响因素.方法 采用自制问卷,在“儿童保健微信群”内对儿科医师(儿科专科医师和儿童保健医师)进行问卷调查.采用单因素和多因素无序多分类Logistic回归分析维生素A补充剂应用的影响因素.结果 共1900名儿科医师完成了问卷调查.72.9%的儿科医师会在临床工作中推荐家长使用维生素A补充剂.接受过维生素A相关培训的儿科医师更倾向于推荐家长应用维生素A补充剂,其中1年内接受培训的OR(95%CI)为6.434(1.954~21.178)