【摘 要】
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联合采用DEAE-纤维素层析、色谱聚焦、NADP亲和层析与Sephadex G-100的凝胶过滤,对人脑醛糖还原酶(EC1.1.1.21;ALR)进行纯化.现测得该酶的等电点pH值为5.85.经聚丙烯酰胺凝胶
【机 构】
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湖南医科大学,德克萨斯大学医学院 人类生化与遗传学系
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联合采用DEAE-纤维素层析、色谱聚焦、NADP亲和层析与Sephadex G-100的凝胶过滤,对人脑醛糖还原酶(EC1.1.1.21;ALR)进行纯化.现测得该酶的等电点pH值为5.85.经聚丙烯酰胺凝胶盘状电泳和Western印迹证实,获得了满意的酶纯度.同葡萄糖,葡糖-6-磷酸与NADPH保温后,人脑ALR纯品的活性与对照酶组相似,且不被糖酵解途径的一些磷酸化中间产物抑制.苯基硼酸琼脂糖柱层析洗脱谱峰和氢硼化钠还原反应提示,当同葡萄糖保温时,人脑ALR(特别是其均一态)可能未被进一步糖基化.在糖尿病并发症和按结构完成药物设计的研究工作中,纯品ALR的应用可发挥重要作用.
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