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目的 观察体外经传代培养去分化的成人关节软骨细胞,在生物反应器培养后生物学性状的变化,探索去分化软骨细胞反分化的手段,为软骨细胞移植修复关节软骨缺损建立合适的体外培养方法。方法 无菌条件下取成人关节软骨组织,Ⅱ型胶原酶消化法(0.2%,37C,3h)分离软骨细胞,分成两组:一组常规单层传代培养,另一组添加重组人的生长因子(1ng/ml转化生长因子β1+5ng/ml成纤维细胞生长因子2)体外培养传代大量扩增后,无微载体生物反应器内培养3周。血小板计数器行细胞计数,计算各代细胞倍增时间;细胞爬片和石蜡、冰冻切