Ang2、Tie2基因的RNA干扰及其在体外抑制血管生成的作用

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目的:探讨应用RNA干扰(RNA interference,RNAi)技术沉默Ang2、Tie2基因及其在体外抑制血管生成的研究,为将来进一步进行抑制肿瘤血管生成的动物实验研究奠定基础,为肿瘤的基因治疗提供实验依据。方法:用pSilencer1.0-U6-Ang2/Tie2-siRNA重组质粒转染人脐静脉内皮细胞(HUVECs),采用RT-PCR检测各组HUVECsAng2、Tie2的mRNA表达状况。应用体外血管生成的三维培养模型研究转染后的HUVECs在体外形成血管样结构的情况。结果:pSilencer1.0-U6-Ang2/Tie2-siRNA重组质粒转染HUVECs后,RT-PCR检测结果显示:Ang2、Tie2基因mRNA的表达水平均受到明显抑制(P<0.05),并且siRNA的2条重组质粒之间均无明显差别(P>0.05)。转染后的HUVECs在体外三维培养模型中血管样结构形成的数量和长度均明显减少(P<0.05),表明血管生成受到明显抑制。结论:Ang2-siRNA、Tie2-siRNA能够抑制HUVECs中Ang2和Tie2的mRNA表达,从而在体外抑制血管生成。
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